CDCSTChina Daily Chemical Science Technology2997-70962997-710XArt and Design10.61369/CDCST.2025030020Article枯草芽孢杆菌发酵来源的抗菌肽安全性及功效性研究https://artdesignp.com/journal/CDCST/2/3/10.61369/CDCST.2025030020徐思伟,王珍珍,林琳,陈丽,王蕊蕊2025232025-09-25开发一种以豆柏和玉米粉为主要培养基的枯草芽孢杆菌发酵来源抗菌肽，评估其安全性及抑菌活性，探索其作用机制及应用潜力。通过内毒素、抗生素残留及耐药性实验验证安全性；采用抑菌圈实验测定对金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌、大肠杆菌等菌株的抑制效果；利用耐药性诱导实验（10代传代）检测MIC稳定性；通过鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验观察血管溶解效应；结合质谱分析鉴定多肽序列，并推测其作用机制。该抗菌肽在0.05%浓度下对金黄色葡萄球菌（DIZ=[41.27±0.11]mm） 和痤疮丙酸杆菌（DIZ=[28.76±0.20]mm） 抑制效果显著， 对大肠杆菌呈浓度依赖性抑制（DIZ=[15.28±0.15]mm）， 但对表皮葡萄球菌和白色念珠菌无显著作用。耐药性诱导后， 其对金黄色葡萄球菌的MIC值稳定（0.25μg/mL）。CAM实验显示浓度依赖性血管溶解（0.01%~0.05%）。质谱鉴定出20 条特征多肽序列（如YVEELKQLPGEKIISPDEII），作用机制涉及膜破坏、金属离子螯合及DNA结合。该抗菌肽具有高效抑菌活性、低耐药风险及多靶点作用机制，对皮肤共生菌影响小，在痤疮治疗护肤品中具有潜在应用价值。枯草芽孢杆菌,耐药性,痤疮丙酸杆菌,表皮葡萄球菌,金黄色葡萄球菌

[1]CHEN MENGLING, WANG HUI, ZHANG CHUANG, et al. Recent advances in antimicrobial lipopeptide fengycin secreted by Bacillus: Structure, biosynthesis, antifungal mechanisms, and potential application in food preservation[J]. Food Chemistry, 2025, 489144937.[2]李道明, 王瑛, 陈超, 等. 芽孢杆菌几种重要抗菌脂肽研究进展[J]. 生物工程学报, 2022, 38(05):1768-1783.[3]翟少伟, 李剑, 史庆超. 抗菌脂肽Surfactin的抗菌活性及应用[J]. 动物营养学报, 2015, 27(05):1333-1340.[4] 张淘崴, 乌日娜, 纪帅奇, 等. 豆酱源枯草芽孢杆菌S1-2产细菌素分离鉴定及其稳定性研究[J]. 食品工业科技, 2024, 45(08):158-164.[5] 白杰, 贠建民, 祝发明, 等. 枯草芽孢杆菌菌株B3抗菌肽的分离纯化与鉴定[J]. 食品与发酵工业, 2018, 44(08):78-85.[6] 胡瑞萍, 张铎, 张丽萍, 等. 枯草芽孢杆菌BSD-2一种抗菌肽的分离纯化与鉴定[J]. 华北农学报, 2011, 26(06):201-206.[7]苗永美, 苗翠苹, 于庆才. 枯草芽孢杆菌BBs-27发酵液性质及脂肽对黄色镰刀菌的抑菌作用[J]. 生物技术通报, 2023,39(09):255-267.[8]李红亚, 李术娜, 王树香, 等. 益生芽孢杆菌脂肽类抑菌成分的高效液相色谱-电喷雾串联质谱分析[J]. 动物营养学报, 2017,29(04):1191-1197.[9]付云, 赵谋明, 庞一扬, 等. 源自螺旋藻渣枯草芽孢杆菌发酵抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素对金黄色葡萄球菌抑菌机制对比研究[J]. 食品科学, 2021, 42(01):108-114.[10]袁勇军, 汪吴, 戚向阳. B.Subtilis Y-6产抗菌肽对桃软腐菌的抑制机理研究[J]. 核农学报, 2014, 28(06):1047-1051.[11] 高娟娟, 贾丽艳, 畅盼盼, 等. 枯草芽孢杆菌细菌素A32 的抑菌机理研究[J]. 中国食品学报, 2021, 21(10):56-64.[12]张晨雪, 蔡彤, 陈晨, 等. 细菌内毒素检查微量凝胶法的研究[J]. 中国药物警戒, 2024, (8).[13]国家药品监督管理局. 国家药监局关于将化妆品毒理学试验方法样品前处理通则等19项制修订项目纳入化妆品安全技术规范（2015年版） 的通告（2024年第12号）[EB/OL]. 北京: 国家药监局, 2024[https://www.nmpa.gov.cn/xxgk/ggtg/hzhpggtg/jmhzhptg/20240321171624153.html.[14]ISO. ISO 20776-1:2019, Susceptibility testing of infectious agentsand evaluation of performance of antimicrobial susceptibility test devices.Part 1: Broth micro-dilution reference method for testing the invitro activity of antimicrobial agents against rapidly growing aerobic bacteria involved in infectious diseases[S]. Switzerland:ISO (the International Organization for Standardization) 2019.[15]王世强. 打孔法测定抗生素的效价[J]. 生物学通报, 2005,(03):2-2.[16] 柳成东, 肖明霞, 李琦华, 等. 饲用益生菌凝结芽孢杆菌抑菌性能的研究[J]. 中国畜牧杂志, 2021, 057(010):236-241.[17]INSTITUTE CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS. CLSI M07, Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grows Aerobically[S]. Wayne:CLSI Document MO7-A9, 2012.[18]王宁, 洪新宇, 帅怡, 等. 鸡胚绒毛尿囊膜血管试验在化妆品安全性评价中的应用研究[J]. 现代预防医学, 2016, 43(22):4163-4165+4199.[19] 周建嫦, 杨明杰, 杨杏芬, 等. 眼刺激试验离体替代方法研究进展[J]. 卫生研究, 2004, (04):515-517.[20]WANG SHUNXI, TIAN LEI, LIU HAIJUN, et al. Large-Scale Discovery of Non-conventional Peptides in Maize and Arabidopsisthrough an Integrated Peptidogenomic Pipeline[J]. Molecular Plant, 2020, 13(7):1078-1093.[21]KI V. and ROTSTEIN C. Bacterial skin and soft tissue infections in adults: A review of their epidemiology, pathogenesis, diagnosis, treatment and site of care[J]. Can J Infect Dis Med Microbiol, 2008,19(2):173-84.[22]顾建青. 金黄色葡萄球菌与特应性皮炎[J]. 中华临床免疫和变态反应杂志, 2023, 17(04):381-382.[23]胡新月, 王德娴, 宋丽雅. 表皮葡萄球菌对皮肤健康的作用研究进展[J]. 微生物学通报, 2023, 50(01):368-376.[24]PETKOVSEK Z., ELERSIC K., GUBINA M., et al. Virulence potential of Escherichia coli isolates from skin and soft tissue infections[J]. J Clin Microbiol, 2009, 47(6):1811-7.[25]黄舒燕, 黄卫东, 蔡蕾, 等. 重度痤疮患者皮肤菌群多样性研究[J]. 福建医药杂志, 2025, 47(02):5-8+129.[26]MAMOU GIDEON, CORONA FEDERICO, COHEN-KHAIT RUTH, et al. Peptidoglycan maturation controls outer membrane pro-tein assembly[J]. Nature, 2022, 606(7916):953-959.[27]马良. 界面上抗菌肽CM15与磷脂膜作用机理以及Ca2+对DNA 水化层结构影响[D]. 2021.[28] 尹杨燕, 彭昊, 李小宁, 等. 枯草芽孢杆菌体外抑菌试验及其抑菌蛋白的鉴定[J]. 畜牧与兽医, 2022, 54(12):57-63.